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          你知道SEM掃描電鏡如何制備含水的樣品嗎?

          日期:2024-09-12 09:30:46 瀏覽次數:154

          掃描電鏡制備含水樣品的過程相對復雜,需要特別注意樣品的干燥和導電性處理,以確保在真空環境下能夠獲得高質量的圖像。以下是一個詳細的制備流程:

          1. 取材與清洗

          取材:選擇合適的生物或含水樣品,確保樣品具有代表性且能夠反映所需觀察的特征。

          清洗:使用等滲的生理鹽水或緩沖液清洗樣品表面,去除血液、組織液或粘液等附著物,避免這些雜質影響觀察結果。對于難以清洗的樣品,可以采用超聲震蕩或酶消化的方法進行處理。

          掃描電鏡.jpg

          2. 固定

          使用適當的固定劑(如戊二醛)固定樣品。固定劑的選擇應基于樣品的類型和所需觀察的特征。通常,戊二醛可以交聯蛋白質,使樣品更堅硬,便于后續處理。

          將樣品浸入固定液中,固定時間應適當延長,特別是對于較大的樣品。固定后,用緩沖液清洗樣品,以去除多余的固定劑。

          3. 脫水

          含水樣品在真空環境下會放出氣體,導致成像問題。因此,需要通過逐漸用有機溶劑(如乙醇)替代水的方法將樣品脫水。

          常用的脫水過程是梯度脫水,即依次使用不同濃度的乙醇或丙酮(如30%、50%、70%、90%、****)浸泡樣品,每次浸泡一段時間,直至樣品完全脫水。

          4. 干燥

          完全去除樣品中的水分以避免在真空環境下形成水蒸氣。常用的干燥方法包括臨界點干燥和冷凍干燥。

          臨界點干燥是一種在超臨界狀態下(如超臨界二氧化碳)去除樣品中水分的方法,可以*大限度地減少樣品結構的破壞。

          冷凍干燥則是將樣品快速冷凍后,在低溫下通過升華的方式去除水分。

          5. 導電涂層

          為了提高樣品的導電性,避免由于電荷積聚導致成像質量下降,需要對樣品進行導電涂層處理。

          常用的導電涂層材料包括金屬(如金、銀)和碳等。通過濺射或蒸發等方法將導電材料均勻地涂覆在樣品表面。

          6. 安裝與觀察

          將制備好的樣品安裝在SEM掃描電鏡樣品支架上,確保樣品穩定且易于觀察。

          將樣品放入掃描電鏡中進行觀察,并根據需要調整SEM掃描電鏡的參數以獲得更好的圖像效果。

          注意事項

          在整個制備過程中,需要嚴格控制每個步驟的條件,以確保樣品的質量。

          避免污染和損傷樣品,特別是在清洗、固定和脫水等步驟中。

          對于特別敏感的樣品,可能需要采用特殊的處理方法來減少對其結構的破壞。

          通過以上步驟,可以制備出適合掃描電鏡觀察的含水樣品,并獲得高質量的圖像結果。

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